色谱柱的正确使用和维护十分重要,稍有不慎就会降低柱效、缩短使用寿命甚至损坏。在色谱操作过程中,需要注意下列问题,以维护色谱柱。
?、俦苊庋沽臀露鹊募本绫浠叭魏位嫡鸲N露鹊耐蝗槐浠蛘呤股字痈叽Φ粝露蓟嵊跋熘诘奶畛渥纯?;柱压的突然升高或降低也会冲动柱内填料,因此在调节流速时应该缓慢进行,在阀进样时阀的转动不能过缓(如前所述)。
②应逐渐改变溶剂的组成,特别是反相色谱中,不应直接从有机溶剂改变为全部是水,反之亦然。
③一般说来色谱柱不能反冲,只有生产者指明该柱可以反冲时,才可以反冲除去留在柱头的杂质。否则反冲会迅速降低柱效。
?、苎≡袷褂檬室说牧鞫啵ㄓ绕涫莗H),以避免固定相被破坏。有时可以在进样器前面连接一预柱,分析柱是键合硅胶时,预柱为硅胶,可使流动相在进入分析柱之前预先被硅胶“饱和”,避免分析柱中的硅胶基质被溶解。
?、荼苊饨矢丛拥难酚绕涫巧镅分苯幼⑷胫?,需要对样品进行预处理或者在进样器和色谱柱之间连接一?;ぶ?。?;ぶ话闶翘钣邢嗨乒潭ㄏ嗟亩讨1;ぶ梢远矣Ω镁8?。
?、蘧S们咳芗脸逑瓷字宄A粼谥诘脑又?。在进行清洗时,对流路系统中流动相的置换应以相混溶的溶剂逐渐过渡,每种流动相的体积应是柱体积的20倍左右,即常规分析需要50~75ml。